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魚類的人工繁殖技術(shù)

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第一節(jié) 概述


魚類人工繁殖是根據(jù)魚類的自然繁殖習(xí)性,在人工控制條件下,通過生態(tài)、生理的方法,促使親魚的性產(chǎn)物達(dá)到成熟、排放和產(chǎn)出,獲得大量的受精卵,并在適當(dāng)?shù)姆趸瘲l件下最終孵化出魚苗的生產(chǎn)過程。整個過程包括親魚培育、人工催產(chǎn)和人工孵化三個主要技術(shù)環(huán)節(jié)。魚類人工繁殖可穩(wěn)定而大量地提供養(yǎng)殖用種苗,為水產(chǎn)養(yǎng)殖的持續(xù)健康發(fā)展提供物質(zhì)基礎(chǔ)。

一、魚類人工繁殖原理

魚類自然繁殖是在水溫、水流、溶氧、光照、水位的變化,以及性引誘和卵的附著物等外界條件下進(jìn)行的。當(dāng)這些生態(tài)條件綜合而又適度地刺激性腺發(fā)育良好的親魚感覺器官(如側(cè)線、皮膚、視覺、聽覺和嗅覺等)的感覺細(xì)胞時,魚即產(chǎn)生沖動,并通過神經(jīng)纖維傳入中樞神經(jīng),刺激下丘腦并使之相應(yīng)地分泌促性腺激素釋放激素(GnRH)。由該激素通過微血管進(jìn)入腦下垂體后,促使腦垂體間葉分泌促性腺激素(GtH),通過血液進(jìn)入性腺,卵細(xì)胞即發(fā)生顯著變化,如卵黃顆粒融合呈半透明狀態(tài)、細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)極化現(xiàn)象、核膜溶解、進(jìn)行兩次成熟分裂等。在卵母細(xì)胞的成熟變化過程中,濾泡膜便破裂并進(jìn)行排卵和產(chǎn)卵;而雄魚的精液量顯著增加,并出現(xiàn)性行為,使魚類完成繁殖活動。由于池塘等小水體對某些魚類缺乏相應(yīng)的繁殖生態(tài)條件,不能適度地刺激親魚的下丘腦分泌促黃體生成素釋放激素,從而不能促使親魚的垂體分泌一定濃度的促性腺激素使親魚自然產(chǎn)卵。因此,人工繁殖就在于將催情劑(如魚的腦下垂體抽提液、人絨毛膜促性腺激素或促黃體生成素釋放激素類似物)注入魚體,達(dá)到誘導(dǎo)親魚發(fā)情、產(chǎn)卵或排精的目的。

按親魚是來源于天然水域或人工培育,可分為半人工繁殖和全人工繁殖。前者受捕撈水域和季節(jié)的限制性大,生產(chǎn)不穩(wěn)定。后者從親魚培育至魚苗孵出都在人工控制下進(jìn)行,可按計劃大量生產(chǎn)魚苗。

促使親魚成熟、產(chǎn)卵的方法一般可分為生態(tài)法、生理法和生態(tài)生理結(jié)合法。生態(tài)法是在魚類自然繁殖的適溫季節(jié)內(nèi),選擇成熟的親魚進(jìn)行雌雄配對,滿足其產(chǎn)卵的生態(tài)條件,使親魚自行繁殖或進(jìn)行人工采卵和授精。此法多用于對產(chǎn)卵生態(tài)條件要求較低的魚類,如虹鱒等。生理法是在自然繁殖季節(jié)對某些無法滿足其成熟產(chǎn)卵生態(tài)條件,而性腺發(fā)育良好的親魚注射催情劑,一般能促使其性腺成熟,達(dá)到產(chǎn)卵和排精的效果,適用中國鯉科養(yǎng)殖魚類、印度鯉科魚類、閃光鱘等。生理生態(tài)法是將生態(tài)法和生理法結(jié)合運用,既注射催情劑又提供合適的生態(tài)條件,其效果最好。

、魚類人工繁殖的生物學(xué)指標(biāo)

魚類人工繁殖是一項技術(shù)性要求較高的生產(chǎn)活動,衡量魚類人工繁殖生產(chǎn)技術(shù)水平的高低,不僅要看生產(chǎn)苗種的總產(chǎn)量的高低,還要看有關(guān)生物學(xué)指標(biāo)。

1、親魚成熟率 

親魚的成熟率是指能催產(chǎn)的親魚尾數(shù)占所培育適齡繁殖親魚總尾數(shù)的百分?jǐn)?shù),用于評價親魚培育水平的高低,即親魚成熟率越高,親魚培育技術(shù)就越好,技術(shù)水平越高。

2、催產(chǎn)率 

催產(chǎn)率是指親魚催情注射后產(chǎn)卵的雌魚占所催產(chǎn)的雌親魚的百分?jǐn)?shù)。用于評價親魚成熟度鑒別和催產(chǎn)技術(shù)水平的高低。

3、受精率 

受精率是指受精卵占總卵數(shù)的百分?jǐn)?shù)。計算受精率時,應(yīng)在原腸中期,取同批次魚卵百余粒,肉眼直接觀察計數(shù)受精卵與渾濁、發(fā)白的壞卵(或空心卵)量。                

4、孵化率 

初孵仔魚與受精卵數(shù)量之比值。出膜期不易準(zhǔn)確統(tǒng)計,一般用出膜前期活胚胎占總受精卵總數(shù)百分比表示孵化率。

5、出苗率 

出苗率也稱下塘率,即下塘前魚苗的絕對數(shù)量占受精卵數(shù)的百分比。

第二節(jié) 魚類人工繁殖的主要設(shè)施

一、水質(zhì)凈化處理設(shè)施

魚類人工繁殖對水質(zhì)要求較高,尤其是封閉式循環(huán)水人工繁殖系統(tǒng),用水必須回收凈化處理再利用,要達(dá)到魚類繁殖最佳水質(zhì)要求,必須具有功能完善、運轉(zhuǎn)良好的水質(zhì)凈化系統(tǒng)。水質(zhì)凈化系統(tǒng)一般包括沉淀池、過濾器、蓄水池和消毒裝置等。

二、產(chǎn)卵設(shè)施

產(chǎn)卵池一般容積50~100m3,池深1.5~2.0m。形狀有圓形、八角形、長方形,以圓形為好。通常為磚水泥結(jié)構(gòu),池壁、池底要光滑,以免傷到魚卵。圓形或八角形池,排水口設(shè)在池底中央,池底略向中央排水口傾斜,傾斜度為3%~5%,將污物集中于水池中央然后由排水口排出。進(jìn)水管直徑15~20cm,與產(chǎn)卵池壁切線成40°夾角,設(shè)在距產(chǎn)卵池墻壁頂緣30~40cm處。長方形產(chǎn)卵池在一端進(jìn)水,另一端底部排水。用閥門調(diào)節(jié)進(jìn)水流量、流速,達(dá)到進(jìn)水時水流沒有死角。

1、產(chǎn)漂流性卵或沉性卵魚類的產(chǎn)卵集卵池 

對于產(chǎn)漂流性卵或沉性卵的魚類,多用圓形產(chǎn)卵池和橢圓形產(chǎn)卵池,面積50~100m2。池底中心設(shè)方形或圓形出卵口一個,上蓋攔魚柵,卵由暗道引入集卵池。集卵池一般為長2.5m,寬2m的長方形,底部較產(chǎn)卵池底低25~30cm。在集卵池一側(cè)設(shè)溢水口一個,底部設(shè)排水口一個,由閥門控制排水。集卵池內(nèi)一邊設(shè)階梯3~4級,每一級階梯設(shè)排水孔一個,可采用階梯式排水。集卵網(wǎng)與出卵暗管相聯(lián),放置在集卵池內(nèi),以收集魚卵。

2、產(chǎn)浮性卵魚類的產(chǎn)卵集卵池 

對于產(chǎn)浮性卵魚類在圓形產(chǎn)卵池水面下20~30cm處,設(shè)置一個口通向集卵槽,在集卵口處裝一個用直徑100 mm的管剖成兩半做成的管片,利用池水旋轉(zhuǎn)形成的水流將卵子導(dǎo)入集卵槽中。

3、產(chǎn)粘性卵魚類的產(chǎn)卵池與魚巢 

對于產(chǎn)粘性卵的魚類多用池塘或長方形產(chǎn)卵池,同時配備人工魚巢。魚巢是親魚產(chǎn)卵時的附著物。只要是纖細(xì)多枝在水中易散開而不易腐爛的均可成為扎制魚巢的材料。生產(chǎn)上多采用水草(聚草、金魚藻等)、水中楊柳樹的根須、棕櫚皮和人造纖維等。楊柳根須和棕櫚皮需用水煮過曬干,除去單寧酸等有毒物質(zhì)。魚巢材料經(jīng)消毒處理后,扎制成束。魚巢在產(chǎn)卵池內(nèi)布置適當(dāng)與否,能直接影響到雌魚的產(chǎn)卵效率和魚卵在巢上的附著率。在池塘中懸吊人工魚巢可分為環(huán)列式和平列式等2種。

魚巢的管理應(yīng)注意下列3點:

準(zhǔn)確估計產(chǎn)卵時間。及時投放魚巢,過早投放用稻草扎制的魚巢,久浸水中容易腐爛而影響水質(zhì),用棕櫚皮和楊柳根須扎制的魚巢,久浸水中則容易附著過多的淤泥而影響魚卵的附著。過遲投放魚巢則使親魚的成熟卵不能及時產(chǎn)出,影響產(chǎn)卵效果。

適量投放魚巢。每尾雌魚以投放4~5束魚巢為準(zhǔn),過少則魚卵粘著過密,將降低孵化率。

及時取換魚巢。發(fā)現(xiàn)魚巢魚卵附著適度時,應(yīng)及時取出孵化,并更換新的魚巢入池。

三、孵化設(shè)施

1、孵化桶 

孵化桶是用白鐵皮、塑料或鋼筋水泥制成的漏斗形孵化器。孵化桶大小根據(jù)需要而定,一般以容水量250kg左右為宜。孵化桶的紗窗可用銅絲布或篩絹制成,規(guī)格為50目左右。孵化桶進(jìn)水在漏斗底部,由桶上端紗窗處出水,水由下而上,魚卵也隨之翻動。   

2、孵化環(huán)道 

孵化環(huán)道是用水泥或磚砌成的環(huán)形水池,其大小根據(jù)生產(chǎn)規(guī)模確定。孵化環(huán)道具有容量大、省勞力、操作方便、經(jīng)久耐用、孵化率高等優(yōu)點,但一次投資較大,設(shè)計和施工技術(shù)要求高,建造場所必須具備方便的水源,有一定局限性。

圓形孵化環(huán)道有單環(huán)和多環(huán)之分。直徑小型為3~4m,大型為8m,環(huán)道寬1m,深0.9m,分別可容水7t和20t,一次容納授精卵數(shù)量可達(dá)700萬粒和1500萬粒。由于水在環(huán)道內(nèi)圍繞圓心做等圓周運動,因受離心力的作用,受精卵靠環(huán)道外側(cè)密,內(nèi)側(cè)稀,垂直和水平分布不均勻。為了克服這一缺點,生產(chǎn)在圓形環(huán)道的基礎(chǔ)上設(shè)計出了橢圓形(或稱長圓形)環(huán)道。

3、孵化槽 

一般建在地面上,也可低于地面。由槽體、進(jìn)水管、排水管、過濾紗窗組成(圖4-11)。槽長度為3.0m,寬1.5m,深1.2m,槽壁上半部設(shè)一排水管或溝。底部設(shè)兩排噴嘴(5個),呈鴨嘴形狀,使噴出水流由下向上滾動,經(jīng)紗窗流出槽外,底部向噴水方向稍有傾斜,前端有一方形或圓形出苗孔,由暗管通向集苗池。集苗池長1.5m,寬1.0m,深1.0m,用插板閘門控制水位和排水量。孵化槽屬于大型孵化設(shè)施,孵化率在95%左右。具有占地面積小,結(jié)構(gòu)簡單,操作維修方便等優(yōu)點??晒?jié)省勞力,減輕勞動強(qiáng)度,且生產(chǎn)能力比孵化環(huán)道高2~3倍,并適應(yīng)多種魚類的孵化;有些魚類(如鯉、鳊等)可直接在孵化槽中產(chǎn)卵和孵化,減少了移動魚卵過程中的麻煩和損失。孵化管理主要是控制水位,定期洗刷紗窗,檢查水流。

四、增氧與控溫設(shè)施

1、增氧設(shè)施 

親魚培育池一般按照每6667m2水面配備1臺3kw或2臺2kw的葉輪式增氧機(jī)。產(chǎn)卵孵化池、育苗池增氧主要采用羅茨鼓風(fēng)機(jī),一般有效水深在1.5m以下,選用風(fēng)壓20~34kPa的充氣機(jī);有效水深1.8~2.0m時,選用34~49kPa的充氣機(jī)。充氣機(jī)向產(chǎn)卵孵化池、育苗池充入的氣量目前無嚴(yán)格的公式進(jìn)行計算,但應(yīng)在試驗和生產(chǎn)實踐中獲得數(shù)據(jù),如海水育苗池,每分鐘向池內(nèi)水體充入的空氣量(m3/min)為育苗水體(m3)的1%~5%。與鼓風(fēng)機(jī)相連的送氣管分為主管、分管及支管。主管為直徑12~18cm的硬質(zhì)塑料管,連接鼓風(fēng)機(jī);分管為直徑6~9cm的硬質(zhì)塑料管,與支管連接處設(shè)有氣量調(diào)節(jié)開關(guān);支管為直徑0.6~1cm的塑料軟管,末端與散氣石(管)連接。散氣石由100~150號金剛砂鑄制成圓柱狀,長5~10cm,直徑3~4cm,育苗池內(nèi)以每平方米安裝1~3個,各育苗池內(nèi)所用散氣石型號要求一致,以保證出氣均勻。散氣石氣孔越細(xì),越能提高水中溶氧量,但氣孔容易被藻類等堵塞,必須經(jīng)常清洗和更換。散氣管是在管徑1.0~1.5cm無毒聚氯乙烯硬管上鉆孔徑0.5~0.8mm的許多小孔,管兩側(cè)每隔2~5cm交叉鉆孔,各散氣管間距為0.5~0.8m。全部小孔的總面積應(yīng)小于鼓風(fēng)機(jī)出氣管截面積的20%。使用羅茨式鼓風(fēng)機(jī),為使各管道壓力均衡并降低噪音,可在鼓風(fēng)機(jī)出風(fēng)口后加裝氣包,上面裝壓力表、安全閥、消音器。

2、控溫設(shè)施 

大多數(shù)人工繁殖場的親魚培育、產(chǎn)卵孵化、餌料生物培養(yǎng)、魚苗培育等生產(chǎn)環(huán)節(jié)均需要加溫處理,因此應(yīng)配備增溫設(shè)施。目前主要有燃煤鍋爐和電加熱器等2種增溫方法。燃煤鍋爐比較經(jīng)濟(jì)安全。鍋爐的總供熱量應(yīng)是魚苗水體最大換水量升溫所需要的熱量、每日全部魚苗水體所散發(fā)熱量、每日保持室內(nèi)空氣溫度采暖的熱量和各部分蒸汽管道輸氣損失熱量的總和。一般1000m3水體配備1~2t的鍋爐。鍋爐蒸汽或熱水通過盤管使池內(nèi)水溫上升。盤管直徑一般為5.08~7.62cm的無縫鋼管,外涂無毒防腐涂料。孵化池和魚苗池內(nèi)一般不用盤管,以免造成清污、出苗不便??稍陬A(yù)溫池內(nèi)設(shè)置盤管加溫后隨時向孵化池和魚苗池內(nèi)補(bǔ)水控溫。電加熱器有線電熱棒、電熱板、遠(yuǎn)紅外輻射加熱等,直接加溫。

五、其他輔助設(shè)施

1、檢測設(shè)備 

魚類人工繁殖場要建設(shè)水質(zhì)分析及生物檢測室,配備相應(yīng)的實驗人員,以及生物觀察和水質(zhì)分析設(shè)備。如對用水的溶解氧、pH值、鹽度、氨氮、硫化氫等進(jìn)行監(jiān)測;對生物樣品進(jìn)行解剖和顯微觀察。

2、電力設(shè)施 

應(yīng)根據(jù)魚場電力的使用總量估算配置變壓器,保證取水、充氣、加溫和辦公、生活等有充足電力,同時配備柴油發(fā)電機(jī),以便應(yīng)急使用。

3、庫房 

分生產(chǎn)工具存放間和飼料存放間。前者用來存放水泵、網(wǎng)具、各種管、桶等生產(chǎn)工具和設(shè)備;后者主要存放飼料、肥料等。庫房應(yīng)離生產(chǎn)區(qū)較近,且車輛出入方便,房間通風(fēng)、避陽,注意防潮、防蟲、防鼠害等。

第三節(jié) 親魚培育

親魚是指達(dá)到性成熟并能用于人工繁殖的雌雄魚類。培育可供人工催產(chǎn)的優(yōu)質(zhì)親魚,是魚類人工繁殖決定性的物質(zhì)基礎(chǔ)。整個親魚的培育過程都應(yīng)圍繞創(chuàng)造一切有利條件,使親魚性腺向成熟方面發(fā)展。

一、親魚的選擇

(一)親魚來源

1、野外捕撈 

在魚類生殖季節(jié)直接從江河、湖泊、水庫、淺海等自然水域捕撈已達(dá)性成熟的雌雄個體作為親魚。野外捕撈親魚南方一般在冬季,北方在春秋兩季進(jìn)行,因為水溫低,便于運輸。

2、半人工培育 

從野外捕撈的天然苗種或者接近性成熟個體,在人工條件馴化、強(qiáng)化培育,促進(jìn)其性腺成熟。

3、全人工培育 

人工繁殖的魚苗在池塘、網(wǎng)箱或工廠化養(yǎng)魚設(shè)施中進(jìn)行培育,達(dá)到性成熟年齡的個體。

(二)選擇標(biāo)準(zhǔn)

1、種質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)  

從種質(zhì)角度選擇親魚應(yīng)生長速度快、肉質(zhì)好、抗逆性強(qiáng);進(jìn)行雜交育種時,要求親本的種質(zhì)純度高。

2、年齡和體重 

選擇親魚時,應(yīng)避免選擇初次性成熟個體和已進(jìn)入衰老期的個體。對于一般魚類而言,可取最小性成熟年齡加1~10作為選擇人工繁殖所需親魚的最佳年齡。在達(dá)到性成熟年齡的前提下,親魚體重越大越好。一般魚類的年齡和體重存在正相關(guān)關(guān)系,即年齡越大,體重越大。但由于氣候、水質(zhì)和餌料等因素差異,同一種魚在不同水域的生長速度存在差異,達(dá)到性成熟年齡也不同,體重標(biāo)準(zhǔn)也不一致。

3、體質(zhì)標(biāo)準(zhǔn) 

選擇體質(zhì)健壯、行動活潑、無病、無傷的個體作為親魚。

(三)雌雄鑒別

1、大小差異 

有些魚類繁殖群體中雌雄個體大小差異較大,可以根據(jù)大小判別雌雄。如鲇形目的黃顙魚、瓦氏黃顙魚等雄魚生長速度明顯快于雌魚,性成熟時雄魚體重遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過同齡雌魚。石斑魚和黃鱔雌雄同體,雌性先熟,所以雌性個體較小;而黃鰭鯛、平鯛、黑鯛、紫紅笛鯛、尖吻鱸等雌雄同體,雄性先熟,雄魚個體較小。

2、體形差異 

繁殖季節(jié),多數(shù)雌魚性腺發(fā)育程度良好,卵巢充滿大量的成熟卵而腹部膨脹,而雄魚則膨脹不明顯,體形顯得更為修長,可由此鑒別雌雄;一般魚類雌魚腹部具有肛門、生殖孔和泌尿孔3個孔,而雄魚只有肛門和尿殖孔2個孔。鲇形目中的一些魚類,如黃顙魚、長吻鮠等雄魚具有較明顯的三角形生殖突,而雌魚則無。

3、第二性征 

魚類在達(dá)到性成熟時,由于性激素的生理作用,有些種類的親魚會出現(xiàn)第二性征,如婚姻色、胸鰭上的“追星”等,特別是雄性親魚較為明顯,用手觸摸追星有粗糙割手的感覺,而雌魚往往不具備第二性征。

二、親魚的培育

(一)主要淡水魚類的親魚培育

1、鰱、鳙等濾食親魚培育

(1)培育方式和放養(yǎng)密度 

鰱、鳙親魚的培育可采取單養(yǎng)或混養(yǎng)。一般采取混養(yǎng)方式。以鰱為主的放養(yǎng)方式可搭養(yǎng)少量的鳙或草魚;以鳙為主的可搭養(yǎng)草魚,一般不搭養(yǎng)鰱,因鰱搶食兇猛,與鳙混養(yǎng)對鳙的生長有一定影響。但鰱或鳙的親魚培育池均可混養(yǎng)不同種類的后備親魚。放養(yǎng)密度控制的原則是既能充分利用水體又能使親魚生長良好,性腺發(fā)育充分。一般每666.7m2放養(yǎng)重量以150~200kg為宜。為抑制親魚池內(nèi)小雜魚、克氏螯蝦的繁殖,可適當(dāng)搭養(yǎng)少量兇猛魚類,如鱖、大口黑鱸等。主養(yǎng)鰱親魚的池塘,每666.7m2水面可放養(yǎng)16~20尾(每尾體重10~15 kg),另搭養(yǎng)鳙親魚2~4尾,草魚親魚2~4尾(每尾重10kg左右)。主養(yǎng)鳙親魚的池塘,每666.7 m2可放養(yǎng)10~20尾(每尾重10~15 kg)。另搭養(yǎng)草魚親魚2~4尾(每尾重10kg左右)。主養(yǎng)魚放養(yǎng)的雌雄比例以11.5為好。

(2)水質(zhì)管理和施肥 

看水施肥是養(yǎng)好鰱、鳙親魚的關(guān)鍵。整個鰱、鳙親魚飼養(yǎng)培育過程,就是保持和掌握水質(zhì)肥度的過程。親魚放養(yǎng)前,應(yīng)先施好基肥;放養(yǎng)后,應(yīng)根據(jù)季節(jié)和池塘具體情況,施放追肥。其原則是“少施、勤施,看水施肥”。一般每月施有機(jī)肥750~1000kg。在冬季或產(chǎn)前可適當(dāng)補(bǔ)充些精飼料,鳙每年每尾投喂精飼料20kg左右,鰱15kg左右。

產(chǎn)后培育 

產(chǎn)后天氣逐漸轉(zhuǎn)熱,水溫不穩(wěn)定,這時親魚的體質(zhì)又沒有復(fù)原,對缺氧的適應(yīng)能力很差,極易發(fā)生泛池死亡。每天注意觀察天氣和池水水色的變化情況,看水施肥,做到少施、勤施分散施,同時多加新水,勤加新水的方法。即采用“大水、小肥”的培育方式。

秋、冬季培育 

入冬前要加強(qiáng)施肥(每周500kg左右),使水色較濃;入冬后,再少量補(bǔ)充施肥。如遇天氣晴暖,可適當(dāng)投喂精飼料。即采用“大水、大肥”的培育方式。

春季強(qiáng)化培育 

開春后,最好換去一部分池水,將池水控制在1m左右,以利于提高培育池水溫,易于肥水。適當(dāng)增加施肥量,每天或2~3d潑灑一次,并輔以投喂精飼料,使鰱、鳙親魚吃飽、吃好。即采用“小水、大肥”的培育方式。

產(chǎn)前培育 

臨近產(chǎn)卵季節(jié),鰱、鳙親魚性腺發(fā)育良好,對溶氧的要求更高,一旦溶氧下降,極易發(fā)生泛池。因此在催產(chǎn)前15~20d,應(yīng)少施或不施肥,并經(jīng)常沖水,這對防止泛池和促進(jìn)性腺發(fā)育有很好的效果。即采用從“大水、小肥”到“大水、不肥”的培育方式。

總之,應(yīng)根據(jù)產(chǎn)后補(bǔ)償體力消耗,秋冬季節(jié)積累脂肪和春季促進(jìn)性腺大生長的特點,采取產(chǎn)后看水少施肥,秋季正常施肥,冬季施足肥料,春季精料和肥料相結(jié)合并經(jīng)常沖水的措施。

2、草魚、青魚的親魚培育

(1)放養(yǎng)密度和雌、雄比例 

主養(yǎng)草魚親魚的池塘,每666.7m2放養(yǎng)7~10kg的草魚親魚15~18尾;主養(yǎng)青魚的親魚池,每666.7m2放養(yǎng)20kg以上的青魚8~10尾。此外,還搭配鰱、或鳙的后備親魚5~8尾以及團(tuán)頭魴的后備親魚20~30尾,合計總重量200kg左右。雌、雄比例為11.5,最低不少于11。

(2)草魚親魚的培育 

“青料為主、精料為輔相結(jié)合投喂,定期沖水”是培育好草魚親魚行之有效的方法。無論是從生殖細(xì)胞生長發(fā)育、成熟的營養(yǎng)學(xué)原理還是生產(chǎn)實際的結(jié)果,對草魚親魚的培育,強(qiáng)調(diào)以青飼料為主是科學(xué)而有實際意義的,特別是在春季雌性草親魚卵巢中的第時相卵母細(xì)胞卵黃開始形成到時相卵母細(xì)胞卵黃沉積完畢時期,投喂青飼料尤為重要。因為青飼料中包含的各族維生素和礦物質(zhì)成分,精飼料不能完全代替,恰好這些維生素和礦物質(zhì)又是生殖細(xì)胞在成熟階段所必須的。青飼料的種類主要有麥苗、萵苣葉、苦麥菜、黑麥草、各類蔬菜、水草和旱草。精飼料種類有大麥、小麥、麥芽、豆餅、菜餅、花生餅等。在整個草魚親魚培育過程中,要注意經(jīng)常沖水。沖水的數(shù)量和頻率應(yīng)根據(jù)季節(jié)、水質(zhì)肥瘦和攝食情況合理掌握。一般冬季每周沖水一次;天氣轉(zhuǎn)暖后,每隔3~5d沖水一次,每次3~5h;臨產(chǎn)前15d,最好隔天沖一次,催產(chǎn)前幾天,最好天天沖水。經(jīng)常沖水,保持池水清新是促使草魚親魚性腺發(fā)育的重要技術(shù)措施之一。在秋季和春季應(yīng)有專人管理,加強(qiáng)巡塘,防止泛池事故。

(3)青魚親魚的培育 

青魚親魚培育應(yīng)投喂活螺蜆和蚌肉為主,輔以少量豆餅或菜餅。要四季不斷食。每尾青魚每年需螺、蜆500kg,菜餅10kg左右。其水質(zhì)管理方法同草魚。

3、鯉等雜食性魚類親魚培育方法 

鯉親魚與草魚親魚培育方法相似,按每天2次投喂人工飼料如豆粕、酒槽等,或加入蠶蛹粉等動物性飼料,每天投喂量為3%~8%。并加強(qiáng)產(chǎn)后親魚的培育。

4、肉食性魚類親魚培育方法 

肉食性魚類親魚培育的關(guān)鍵是保證有足夠的營養(yǎng),產(chǎn)卵前1~2個月為強(qiáng)化培育階段,期間親魚飼料以新鮮、蛋白質(zhì)含量高的小雜魚、魷魚、烏賊、縊蟶等為主,每天投喂1~2次,投喂量約為魚體重的4%,同時在餌料中添加維生素、魚油,添加量一般約為親魚體重的0.3%,以促進(jìn)親魚性腺發(fā)育。產(chǎn)后應(yīng)將親魚放入網(wǎng)箱或者水質(zhì)較好的池塘中,每天投喂新鮮餌料,以魚飽食為度,一般投喂量占魚體重的6%,經(jīng)15~20d培育,產(chǎn)后親魚可恢復(fù)體質(zhì)。

(二)海水魚類的親魚培育

1、網(wǎng)箱培育親魚

(1)海區(qū)選擇 

選擇網(wǎng)箱養(yǎng)殖的海區(qū),既要考慮其環(huán)境條件能最大限度地滿足親魚生長和成熟的需要,又要符合養(yǎng)殖方式的特殊要求,應(yīng)事先對擬養(yǎng)殖海區(qū)進(jìn)行全面、詳細(xì)的調(diào)查,選擇避風(fēng)條件好、波浪不大、潮流暢通、底質(zhì)平坦、水質(zhì)無污染的內(nèi)灣或淺海,且餌料來源廣、交通方便等。

底質(zhì) 

泥沙底質(zhì)易于下錨,石頭底則下錨不牢,易使網(wǎng)箱移動位置,且若需移動網(wǎng)箱時,網(wǎng)底易被亂石或藤壺、牡蠣等磨破。

水深 

為避免網(wǎng)底被海底碎石磨破或蟹類咬破,并減少親魚排泄物和殘餌的污染,必需使網(wǎng)底和海底保持一定的距離,一般要求在退潮時網(wǎng)底離海底距離不小于2m,而總水深應(yīng)是網(wǎng)箱高度的兩倍以上。

水流和波浪 

由于網(wǎng)箱在水中阻力大,在水流急、風(fēng)浪大的海區(qū),浮動式網(wǎng)箱的網(wǎng)衣不能保持完整的形狀,影響親魚活動空間,不利于親魚的成熟發(fā)育。海區(qū)的流速太小,影響水體的交換量;流速過大,導(dǎo)致親魚因頂水而付出過多的能量消耗,會影響親魚的成熟。最適流速為0.25~1m/s為宜。流速大于1m/s則不適宜養(yǎng)魚。

水溫 

應(yīng)調(diào)查海區(qū)水溫的周年變化,看是否適合擬養(yǎng)品種的適溫要求。原則上,養(yǎng)殖海區(qū)的水溫對養(yǎng)殖品種一定要有足夠的適溫期,以利親魚成熟。如果達(dá)不到這一要求,就不可能在此海區(qū)進(jìn)行該種親魚的培育。

鹽度 

近岸淺海及內(nèi)灣的鹽度往往有較明顯的季節(jié)性變化,應(yīng)選擇在培育對象適鹽范圍內(nèi)的海區(qū)設(shè)置網(wǎng)箱,最好不要設(shè)置在河口或受河流影響大的海區(qū)。也要考慮暴雨季節(jié)無大量淡水流入、鹽度比較穩(wěn)定的海區(qū)。

溶解氧 

自然海區(qū)中的溶解氧對親魚的需要一般是可以滿足的,但是由于網(wǎng)箱設(shè)置過密、放養(yǎng)密度過大、水質(zhì)交換較差、臺風(fēng)前低氣壓或出現(xiàn)赤潮等情況時,海水中溶解氧含量也會低于3mg/L,有些品種就會出現(xiàn)攝食量下降、停食、浮頭乃至死亡。因此,除需備用充氣機(jī)外,更要從網(wǎng)箱設(shè)置密度、親魚放養(yǎng)密度以及網(wǎng)衣網(wǎng)目的大小等方面加以全面考慮。

(2)網(wǎng)箱的選擇 

目前養(yǎng)殖親魚的網(wǎng)箱多為浮筏式網(wǎng)箱,其結(jié)構(gòu)是將網(wǎng)箱懸掛在浮力裝置或木制框架上,網(wǎng)箱頂部浮于水面,大部分網(wǎng)衣沉于水下,網(wǎng)箱隨水位變動而升降。浮筏式網(wǎng)箱培育親魚的優(yōu)點是便于觀察、挑選親魚,也利于對親魚進(jìn)行注射催產(chǎn)等操作。放養(yǎng)親魚時,可根據(jù)親魚的體長來選擇合適的網(wǎng)箱規(guī)格。如果體長50cm以下的親魚,可放養(yǎng)于規(guī)格3 m×3m×3m(深)的網(wǎng)箱,如果體長大于50cm的親魚,要放養(yǎng)于規(guī)格5m×5m×3m(深)以上的網(wǎng)箱,為親魚的成熟發(fā)育提供自由空間。網(wǎng)箱的網(wǎng)目,越大越好,以最小的親魚魚頭不能伸出網(wǎng)目為宜。

(3)親魚的放養(yǎng)密度 

根據(jù)生產(chǎn)實踐經(jīng)驗,每立方米水體放養(yǎng)4~8kg親魚為宜,密度小于4kg/m3,則不能充分利用水體負(fù)載力;密度大于8kg/m3,親魚生活空間擁擠,容易發(fā)病,不利于培育親魚。

(4)日常管理 

每天早晚巡視網(wǎng)箱,觀察親魚活動情況,并且檢查網(wǎng)箱是否有破損,防止網(wǎng)箱意外破爛導(dǎo)致親魚逃逸。每天早上投喂一次,投喂量約為魚體重的3%。投喂時,注意觀察魚的攝食情況,一有異常,立刻采取措施;若水質(zhì)不好,當(dāng)天少投喂或不投喂。若水質(zhì)好,親魚攝食量少或不攝食,應(yīng)把網(wǎng)箱拉起一半,仔細(xì)觀察親魚的情況,必要時取幾尾樣品,進(jìn)行鏡檢,若有病魚,盡快進(jìn)行隔離治療,防止交叉感染。入冬前一個月,親魚每天必須喂飽,使親魚儲存足夠的能量,安全度過冬天。20d左右換一次網(wǎng)。干凈網(wǎng)箱下水前,一定要檢查是否破損,網(wǎng)綱是否堅固。彈跳好的親魚必須加網(wǎng)蓋,防止親魚跳出網(wǎng)箱。臺風(fēng)季節(jié),必須做好防臺風(fēng)工作準(zhǔn)備,檢查漁排的錨繩是否堅固,并且把錨繩拉緊,同時檢查網(wǎng)箱情況。每次臺風(fēng)來臨前都要檢查一次,并且把網(wǎng)箱全部加上網(wǎng)蓋。

(5)強(qiáng)化培育 

產(chǎn)卵前一個半月至2個月為強(qiáng)化培育階段,在這一階段,親魚的餌料以新鮮、蛋白質(zhì)含量高的小雜魚、魷魚、蝦、蟹等為主,每天投喂1次,投喂量約為魚體重的4%,同時在餌料中加入強(qiáng)化劑(成分為維生素、魚油等),每次投喂的強(qiáng)化劑量約為親魚體重的0.3%,促進(jìn)親魚的性腺發(fā)育。一般經(jīng)過一個半月至2個月的強(qiáng)化培育,親魚可以成熟,能自然產(chǎn)卵。檢查親魚成熟程度的方法是:用手輕輕擠壓魚的腹部,精液就會從生殖孔流出來,表示雄魚成熟。雌魚可用采卵器或吸管從生殖孔內(nèi)取卵,若取出的卵已經(jīng)呈游離狀態(tài),表示雌魚已成熟。此時,就可以把親魚移到產(chǎn)卵池產(chǎn)卵,或在網(wǎng)箱四周加掛2~2.5m深的60目篩絹網(wǎng)原地產(chǎn)卵。

(6)產(chǎn)后管理 

親魚在產(chǎn)卵池產(chǎn)完卵后,應(yīng)移入網(wǎng)箱培育。親魚產(chǎn)卵后體質(zhì)虛弱,常會有些受傷,容易感染疾病,必須做好防病措施。若是受輕傷的,用外用消毒藥浸泡后再放下網(wǎng)箱。若受傷嚴(yán)重的,除浸泡外,還要注射青霉素(10000IU/kg魚體重)。投餌時,餌料中加入抗菌消炎藥,如百炎凈等,用量為1g/10kg魚體重,連續(xù)投喂3天。每天投喂新鮮的餌料,以魚食飽為好,一般投喂量為魚體重6%左右,經(jīng)過15~20 

d的精心管理,產(chǎn)后的親魚可以恢復(fù)體質(zhì)。

2、海水池塘培育

(1)池塘選擇 

作為親魚培育的池塘,面積(1/5~1/3)hm2為好,水深2m左右,形狀以長方形為宜,一般東西長,南北寬,長寬比為32,池底平坦,沙泥底質(zhì),排灌方便,環(huán)境安靜。

(2)放養(yǎng)密度 

親魚培育池的放養(yǎng)量一般在900~1500kg/hm2,放養(yǎng)量過大不利于其性腺發(fā)育,過少則浪費水體。雌雄放養(yǎng)比例約為11,可根據(jù)不同種類適當(dāng)調(diào)整。

(3)日常管理

投喂 

親魚的日投喂量一般為親魚體重的5%左右,飼料為促進(jìn)親魚性腺發(fā)育的強(qiáng)化飼料,投喂后要及時清除殘餌,這對預(yù)防魚病發(fā)生、保持水質(zhì)不被污染十分重要。

保持水位,適時進(jìn)行注排水 

親魚培育池的透明度一般要保持在30cm左右,水質(zhì)穩(wěn)定。在親魚性腺迅速發(fā)育時期每星期沖水一次,促進(jìn)性腺發(fā)育。

勤觀察,發(fā)現(xiàn)問題及時處理 

主要是觀察親魚的攝食及活動情況,如有異常,要及時檢查分析原因,并及時處理。

管理記錄 

主要記錄日期、池號、水溫、鹽度、投餌的種類和數(shù)量、注排水情況、魚類的攝食及活動情況、魚病防治情況等內(nèi)容。

第四節(jié) 人工催產(chǎn)

一、親魚成熟度鑒定

為提高催產(chǎn)率,生產(chǎn)上要選擇成熟親魚催產(chǎn)。目前,主要是依據(jù)經(jīng)驗從外觀上來鑒別,對雌魚也可直接挖卵觀察。從外觀上鑒別可概括為“看、摸、擠”3個字。看就是觀察親魚腹部是否膨大;摸就是用手觸摸親魚腹部是否柔軟有彈性;擠是用手?jǐn)D壓親魚腹部兩側(cè)是否有精子或卵子流出。

1、雄親魚 

成熟的雄魚,從頭向尾方向輕擠腹部即有精液流出,若精液濃稠,呈乳白色,入水后能很快散開,說明親魚性成熟好;若精液量少,入水后呈線狀不散開,則表明尚未完全成熟,若精液呈淡黃色近似膏狀,表明性腺過熟,精巢退化。

鲇形目的一些魚類精巢呈樹枝狀,即使雄魚完全性成熟,個體亦較難擠出精液,其成熟度較難鑒定。長吻鮠、瓦氏黃顙魚等雄性腹部具三角形生殖突,可根據(jù)生殖突外觀顏色來確定成熟度,性成熟良好個體生殖突乳白色,生殖突頂部充血,呈紅色針尖狀;成熟度差的個體則整個生殖突肉紅色,頂部與生殖突顏色無異。

2、雌親魚

(1)外形觀察 

成熟雌魚腹部明顯膨大,后腹部生殖孔附近飽滿、松軟且有彈性,生殖孔紅潤,將魚腹朝上托出水面,可見腹部兩側(cè)卵巢輪廓明顯。親魚成熟較好。為避免飽食造成腹部膨大,親魚應(yīng)停食1~2d。

(2)取卵觀察 

用挖卵器直接從卵巢中取出卵粒進(jìn)行成熟度鑒別比外形觀察更可靠,但可能造成卵巢損傷。首先,用竹子、銅、不銹鋼、塑料等制成直徑約3.0~3.5mm,長約20cm的挖卵器,挖卵器頭部開一長約1~2cm,內(nèi)徑2~3mm,深2.5mm的空槽。也可用雞、鴨羽毛在其基部開一小孔作為挖卵器,或用長約20~30cm的聚乙烯管(內(nèi)徑0.86mm,外徑1.52mm)制成。

取卵時將挖卵器輕輕插入親魚生殖孔,然后偏向左側(cè)或右側(cè),旋轉(zhuǎn)幾圈抽出,便可得到少量卵粒。若用聚乙烯管,則用口銜著軟管用力將卵粒從卵巢中吸出。

將獲得卵粒放在載玻片或培養(yǎng)皿上,可以直接觀察卵的大小、顏色及卵核的位置。若卵粒大小整齊,飽滿有光澤,全部或大部分核偏位,表明親魚性腺發(fā)育成熟,可以馬上用于催產(chǎn);如果卵粒小,大小不均勻,卵粒不飽滿,卵核尚未偏位,卵粒相互集結(jié)成塊,不易脫落,表明卵巢尚未發(fā)育成熟,需要進(jìn)一步強(qiáng)化培育;如果卵粒扁塌,無光澤,卵膜發(fā)皺,則表明親魚性腺已開始退化,不適宜催產(chǎn)。為了使卵核觀察清晰,可將卵粒置于培養(yǎng)皿或小瓷盤上,加入少許透明液,2~3min后,不透明卵核就清晰可見。如果卵核偏向于卵膜邊緣,稱之為“極化”,此特征為卵母細(xì)胞發(fā)育到第時相末的重要標(biāo)志,說明卵子已成熟,可以進(jìn)行催產(chǎn)。過熟或退化卵,無核相,則催產(chǎn)效果差。卵子透明液參考配方:A.濃度95%酒精85、水15份;B.酒精85份,福爾馬林(40%甲醛)10份,冰醋酸5份;C.松節(jié)油透醇(松節(jié)醇)75份,75%酒精25份,冰醋酸25份。

二、催產(chǎn)激素

目前用于魚類繁殖的催產(chǎn)劑主要有絨毛膜促性腺激素(HCG)、魚類腦垂體(PG)、促黃體素釋放激素類似物(LRH-A)等。

(一)腦垂體

魚類腦垂體內(nèi)含有多種激素,對魚類催產(chǎn)最有效的成分是促性腺激素(GtH)。GtH是一種大分子的糖蛋白激素,分子量30000左右,反復(fù)使用,易產(chǎn)生抗藥性。腦垂體直接從魚體內(nèi)取得,對溫度變化的敏感性較低。在采集腦垂體時,必須考慮以下因素:

1、腦垂體中的GtH具有種的特異性 

不同魚類的GtH,其氨基酸組成和排列順序不盡相同,結(jié)構(gòu)上的差異,導(dǎo)致魚類GtH具有種間特異性。因此,一般采用在分類上較接近的魚類,如同屬或者同科的魚類腦垂體作為催產(chǎn)劑,盡量消除GtH種間的特異性對催產(chǎn)效果的影響。所以在家魚的人工繁殖生產(chǎn)上,廣泛使用鯉科魚類如鯉、鯽的腦垂體,效果顯著。

2、腦垂體中GtH的含量與性成熟有關(guān) 

只有性成熟的魚類,其腦垂體間葉細(xì)胞中的嗜堿性細(xì)胞才含有大量的分泌顆粒,其GtH的含量才高;反之則含量低。

3、腦垂體中GtH的含量受季節(jié)性影響 

成熟魚類腦垂體GtH含量隨生殖周期的變化而出現(xiàn)極大差異。腦垂體GtH含量最高的時間在魚類產(chǎn)卵前2個月。魚類產(chǎn)卵后,腦垂體中的GtH就基本釋放排空,垂體也萎縮軟化。因此,摘取鯉、鯽腦垂體的時間通常選擇產(chǎn)卵前的冬季或者春季為好。

成熟雌雄魚的腦垂體均可用作催產(chǎn)劑。腦垂體位于間腦下面的碟骨鞍里面,用刀砍去頭蓋骨,將魚腦向后翻開,即可見到乳白色的腦垂體,呈小球狀,用鑷子撕破皮膜即可取出。去除粘附在腦垂體上的附著物,并浸泡在20~30倍體積的丙酮或乙醇中脫水脫脂,過夜后,更換同樣體積的丙酮或無水乙醇,再經(jīng)24h后取出,在陰涼通風(fēng)處徹底吹干,密封干燥4下保存。

常用于催產(chǎn)的有鯉科魚類(主要是鯉)、鯔科魚類和太平洋鮭的腦垂體,也有采用部分提純的鮭腦垂體(SG-100),它被認(rèn)為是最有效的。大多數(shù)腦垂體直接研磨,制成生理鹽水勻漿液,直接注入魚體,很少經(jīng)過有效激素的提純(SG-100除外)。

(二)絨毛膜促性腺激素

HCG是從懷孕2~4個月的孕婦尿中提取的一種糖蛋白激素,分子量為36000左右。由于其結(jié)構(gòu)和功效穩(wěn)定,且成本低,所以已被廣泛應(yīng)用于誘導(dǎo)魚類的性腺成熟和產(chǎn)卵。在物理化學(xué)和生物功能上類似于哺乳類的促黃體素(LH)和促濾泡素(FSH),生理上更類似于LH的活性。HCG直接作用于性腺,具有誘導(dǎo)排卵的作用;同時也具有促進(jìn)性腺發(fā)育,促使性激素產(chǎn)生的作用。有研究表明,重復(fù)超劑量使用將導(dǎo)致魚體產(chǎn)生免疫反應(yīng),可能是由異體活性物質(zhì)的種族特異性引起的。

HCG呈白色粉末狀,市場上銷售的魚(獸)用HCG一般封裝于安瓿瓶中,以國際單位(IU)計量。HCG易吸潮而變質(zhì),因此要在低溫干燥避光處保存,臨近催產(chǎn)時取出備用。儲量不宜過多,以當(dāng)年用完為佳,隔年產(chǎn)品影響催產(chǎn)效果。

(三)促黃體素釋放激素類似物

哺乳動物的下丘腦能分泌作用于腦垂體的促黃體素釋放激素(LRH),其分子量約1182,結(jié)構(gòu)為谷-組-色-絲-酪-甘-亮-精-脯-甘酰氨10種氨基酸組成的多肽。目前已成功地人工合成了LRH,應(yīng)用于牛、羊、豬等哺乳動物并呈現(xiàn)很高的生物活性,但對魚類的催產(chǎn)效果不理想,且用量要高出一般哺乳動物幾百倍。哺乳動物結(jié)構(gòu)的LRH對魚類作用效率低的原因可能有以下2個方面:第一,魚類下丘腦LRH的一級結(jié)構(gòu)與哺乳動物存在差異;第二,LRH的半衰期甚短,因為腦中存在破壞LRH的可溶性酶系。另外,當(dāng)LRH隨血液在體內(nèi)循環(huán)時,又會被內(nèi)臟酶系水解進(jìn)一步破壞。一旦LRH構(gòu)型被破壞,就隨即失去活性。由于LRH不能在體內(nèi)久留,從而影響了催產(chǎn)效果。

為了提高LRH對魚類的催產(chǎn)效果,1975年我國科學(xué)工作者對哺乳類的LRH結(jié)構(gòu)進(jìn)行改型,將LRH第六位的甘氨酸殘基,以D-丙氨酸(或D-亮氨酸、D-色氨酸、D-苯丙氨酸)取代,并去除第十位的甘酰胺,成為一種人工合成的九肽激素,分子量約1167,稱為LRH-A。LRH通過上述改型后,生物活性提高了數(shù)十倍以上,催產(chǎn)效果明顯改善。由于它的分子量小,反復(fù)使用,不會產(chǎn)生抗藥性,并對溫度的變化敏感性較低。且它的靶器官是腦垂體,由腦垂體根據(jù)自身性腺的發(fā)育情況合成和釋放適度的GtH,然后作用于性腺。因此,不易造成難產(chǎn)等現(xiàn)象發(fā)生。LRH不僅價格比HCG和PG便宜,操作簡便,而且催產(chǎn)效果大大提高,親魚的死亡率也大大下降。

LRH-A具體功能如下:

1、刺激腦垂體釋放LH和FSH 

實驗證明,人和各種動物(大白鼠、猴、雞、羊、豬、牛、魚等)對LRH和LRH-A都有反應(yīng)。微克量的外源LRH在60s內(nèi)就能引起人類的反應(yīng),一般注射16min后,血液中LH就升至高峰,30min后血液中FSH升至高峰。血液內(nèi)LH和FSH的水平增高可達(dá)注射前的15~20倍。LRH-A的藥效較長,高峰往往在注射后2~3h出現(xiàn),LH和FSH水平維持一定的高峰可達(dá)4~6h,在體內(nèi)的活性效價為LRH的10~20倍。魚類作LRH-A心臟灌注,2~3min之內(nèi)就能引起魚類的反應(yīng);30min后,血液中GtH就升至高峰,血液中GtH的水平增高可達(dá)注射前的20倍左右,1h之內(nèi)效應(yīng)明顯下降。

2、刺激排卵 

天然的LRH和人工合成的LRH和LRH-A,對各種動物(兔、羊、雞、魚等)都有明顯的誘導(dǎo)排卵作用。

3、刺激腦垂體合成和釋放GtH 

低劑量的LRH-A,能刺激腦垂體合成和釋放GtH,促進(jìn)性腺進(jìn)一步發(fā)育成熟。在催產(chǎn)季節(jié),對性腺發(fā)育較差的青魚、草魚、瓦氏黃顙魚等注射低劑量的LRH-A,可以有效促使性腺發(fā)育成熟。雌魚卵核顯著偏位,趨向成熟;雄魚則精液明顯增加。這種催熟效果比采用鯉、鯽腦垂體或HCG要好得多。

近年來,我國在研究LRH-A的基礎(chǔ)上,又成功開發(fā)出LRH-A2和LRH-A3。實踐證明,LRH-A2對促進(jìn)FSH和LH釋放的活性分別比LRH-A高12倍和16倍;LRH-A3對促進(jìn)FSH和LH釋放的活性分別比LRH-A高21倍和31倍。LRH-A2的催產(chǎn)效果顯著,使用劑量可為LRH-A的1/10;LRH-A3對促進(jìn)親魚性腺成熟的作用也比LRH-A強(qiáng)。

(四)多巴胺抑制劑

魚類下丘腦不僅分泌促性腺激素釋放激素(GnRH),同時也有促性腺激素釋放抑制激素(GRIF),它能抑制腦垂體GtH的釋放,進(jìn)而抑制魚類排卵、產(chǎn)卵和排精。大量證據(jù)表明,多巴胺(DA)是一種抑制促性腺激素釋放的因子,多巴胺的激動劑阿樸嗎啡對GtH的釋放有抑制作用,而其抑制劑皮莫齊特(PIM)則有促進(jìn)性腺激素釋放的作用。采用多巴胺受體的拮抗體地歐酮(DOM)、排除劑利血平(RES),通過競爭多巴胺受體、消竭多巴胺和遏制多巴胺合成等多種途徑來抑制或消除GRIH對GnRH的影響,從而增強(qiáng)腦垂體GtH的分泌,促使性腺的發(fā)育成熟。生產(chǎn)上多巴胺抑制劑不單獨作為催產(chǎn)劑使用,主要與LRH-A合用以進(jìn)一步增強(qiáng)LRH-A誘導(dǎo)魚類分泌GtH和排卵的效力。RES與LRH-A結(jié)合使用構(gòu)成了高效魚類催產(chǎn)合劑1號,DOM與LRH-A組成高效魚類催產(chǎn)合劑2號,高效魚類催產(chǎn)合劑2號比催產(chǎn)合劑1號的效果更好。

三、催產(chǎn)方法

(一)催產(chǎn)季節(jié)

魚類的性腺發(fā)育、成熟等都有其周期性,因此,選擇最適宜的季節(jié)進(jìn)行催產(chǎn)是人工繁殖取得成功的關(guān)鍵之一。雌魚卵巢發(fā)育到能夠有效催產(chǎn)期后有一段“等待”的時期,時間約為15~45d。這個時間段雌魚卵巢對催產(chǎn)劑十分敏感,催產(chǎn)效果好,因此是最適宜的催產(chǎn)季節(jié),生產(chǎn)上必須集中力量,不失時機(jī)地做好催產(chǎn)工作。魚類人工繁殖生產(chǎn)實際中,應(yīng)根據(jù)以下方面選擇最適宜的催產(chǎn)時期。

1、魚的種類 

不同種類的魚,其性腺發(fā)育完全不同,有春季產(chǎn)卵類型,也有秋季產(chǎn)卵類型。如華南地區(qū)紅笛鯛、花尾胡椒鯛的繁殖季節(jié)為3~6月份,平鯛、鯔的繁殖季節(jié)為11月至次年2月。

2、氣候 

我國地域遼闊,南北氣候差異較大,對于大部分淡水鯉科魚類而言,長江中、下游地區(qū)適宜的催產(chǎn)季節(jié)是5月上旬至6月中旬,華南地區(qū)比長江流域早1個月,東北地區(qū)比長江流域晚1個月。

3、性腺發(fā)育成熟度 

親魚培育工作做得好,親魚性腺發(fā)育成熟就早,催產(chǎn)期也可相應(yīng)提前。通常在計劃催產(chǎn)日期前30~45d,檢查親魚性腺發(fā)育情況,根據(jù)親魚性腺發(fā)育成熟度,確定催產(chǎn)時間。

(二)親魚捕撈與配組

保證親魚健康、無病無傷是確保親魚順利產(chǎn)卵受精的重要環(huán)節(jié)。親魚捕撈時,所用網(wǎng)具要柔潤、光滑、網(wǎng)目小,最好使用尼龍網(wǎng)。拉網(wǎng)快慢適中,動作要協(xié)調(diào)迅速,下水抓魚和選魚的人數(shù)不宜過多,一般為2~3人。選魚及運魚要快,防止親魚受傷或缺氧窒息。一個池塘一次捕撈最好不超過3網(wǎng),捕撈次數(shù)過多過密將嚴(yán)重影響親魚身體狀況,可能會造成性腺發(fā)育停滯不前甚至退化。準(zhǔn)備催產(chǎn)用的親魚捕撈后可放入催產(chǎn)池或者網(wǎng)箱中暫養(yǎng),以減少捕撈次數(shù)。

人工催產(chǎn)前,根據(jù)親魚的種類及產(chǎn)卵方式來決定雌雄親魚比例。如果采用自然產(chǎn)卵、自然受精的方式,雌、雄親魚比例應(yīng)為11.1~1.5,若雄魚少,雌雄比例也不應(yīng)低于11。如采用人工授精方式,雄魚可少于雌魚,一尾雄魚至少可供2~3尾同樣體重的雌魚受精。此外,應(yīng)注意同一批催產(chǎn)的雌雄魚,個體大小應(yīng)相差不大,以方便催產(chǎn)劑配制和注射、保證親魚交配協(xié)調(diào)。

(三)催產(chǎn)劑注射

1、注射劑量 

親魚單位體重注射催產(chǎn)劑的量稱之為劑量。準(zhǔn)確掌握催產(chǎn)劑特性和劑量有利于促使親魚順利產(chǎn)卵和排精。注射劑量受親魚種類、性腺發(fā)育成熟度、水溫、催產(chǎn)藥物質(zhì)量等因素影響,生產(chǎn)上應(yīng)靈活掌握。溫度較低或者親魚性腺發(fā)育成熟度差時,劑量可以適當(dāng)提高;催產(chǎn)早期或者末期,劑量可適當(dāng)提高;性腺發(fā)育成熟度好,可以適當(dāng)降低劑量;一般北方使用劑量稍高于南方。一般情況下,雄魚按雌魚劑量減半注射,性腺發(fā)育程度較好的雄魚可以不注射催產(chǎn)劑。

常用催產(chǎn)劑參考劑量(按每 kg體重計算)

草魚LRH-A5~15μg

南方鲇PG1.5~2mg + HCG1500~2000IU + LRH-A20.1μg

鯉LRH-A5~10μg

鞍帶石斑魚HCG400~500IU + LRH-A330~50μg

鮸LRH-A30.8~1.8μg

軍曹魚HCG400~500IU + LRH-A3~6μg + DOM3~5mg

黃鱔HCG3 000IU

鰱、鳙LRH-A10μg

﹡以上均為雌親魚催產(chǎn)劑量。

2、注射液配制 

各種催產(chǎn)劑均需用注射用水或生理鹽水(0.7%)溶解或制成懸浮液后,方能注入魚體。注射藥液量依魚體大小而定,一般每尾魚注射2~4mL;體型較小的魚類(如黃顙魚等),應(yīng)控制在1mL以內(nèi);個體較大的魚(如巨石斑魚等),可根據(jù)激素劑量適當(dāng)增大生理鹽水用量。注射藥液量過少,藥液的濃度大,配制和注射過程中的損失量大,相對誤差則較大;注射藥液量過多,注射時間過長,操作不便,另外,過多的水注入魚體,對魚體液的滲透調(diào)節(jié)不利。注射器、針頭、研缽等用具在使用前要煮沸30min。HCG和LRH-A的配制較為簡單,直接溶解于生理鹽水中即可。而PG配制時應(yīng)先將丙酮保存的PG放在干凈的濾紙上風(fēng)干,待丙酮揮發(fā)后放于無水研缽中充分研磨,然后加注射用的生理鹽水制成懸濁液備用;DOM在配制時也須在研缽中研磨,制成懸濁液。PG和DOM研磨得越細(xì)越好,有利于親魚對其吸收,并可以防止注射時堵塞針頭。配制注射液時,催產(chǎn)激素和生理鹽水的總用量應(yīng)在預(yù)定劑量的基礎(chǔ)上增加5%~10%,以彌補(bǔ)配制和注射時的損耗。注射用催產(chǎn)激素最好在催產(chǎn)前1h內(nèi)配制,并盡快使用,否則易失效,配置過程中應(yīng)盡量減少激素的損耗。

3、注射方法 

催產(chǎn)劑注射包括體腔注射法和肌肉注射法。對于有鱗魚類須采用前者,而無鱗魚類則可使用后者。注射時,對于大規(guī)格親魚可由2人操作,一人托住魚,露出注射部位,并用手輕輕蒙住魚眼防止光照刺激,且使魚不離水,否則親魚極易掙扎可能導(dǎo)致受傷,另一人持針待魚基本安定后注射;對于小型親魚,可由一人獨立操作。注射器可選用1mL、5 mL、10 mL或獸用連續(xù)注射器,針頭6~8號均可,用前需煮沸消毒。注射前應(yīng)將注射液搖勻,并完全排除注射器中的空氣。

(1)肌肉注射 

在背鰭基部與魚體側(cè)線之間的部位,針頭與體軸呈45°角刺入肌肉,緩緩注入藥液,進(jìn)針深度約3cm,或在親魚背鰭后基部中線處,偏向肌肉一側(cè)進(jìn)針。在注射過程中,當(dāng)針頭刺入魚體后,若親魚突然掙扎扭動,應(yīng)迅速撥出針頭,不要強(qiáng)行注射,以免針頭彎曲或劃破親魚體表造成出血發(fā)炎。注射完后,用酒精棉球或碘酒涂抹注射部位,防止感染。

(2)體腔注射 

在胸鰭基部無鱗處的凹入部位,將針頭朝魚體前方與體表成45~60°角刺入約1.5~2.0cm,然后將注射液緩緩注入魚體內(nèi)。針頭刺入魚體不能過深,否則易傷及心臟,引起親魚死亡。生產(chǎn)上初學(xué)者不易掌握刺入的深度,可在注射針上綁上經(jīng)開水或酒精消毒的竹枝,留出進(jìn)針深度約1~2cm,竹枝一端須緊靠注射針基部,接觸魚體端的竹枝必須光滑,以免刺傷魚體表。限制了進(jìn)針深度,可以避免傷及心臟,可有效保證注射成功率。

4、注射次數(shù) 

注射催產(chǎn)劑常用一次注射、二次注射兩種方法,極少數(shù)采用三次注射。一次注射就是將催產(chǎn)藥物一次性注入親魚體內(nèi),二次注射就是將催產(chǎn)藥物分兩次注入魚體內(nèi)。采用兩次注射時,一般第一針注射藥量偏低,約占總預(yù)定藥量的10%~20%,第二次將剩余藥量全部注射入親魚體內(nèi)。有些魚類甚至采用三次注射才能有效催產(chǎn),如青魚。

二次注射催產(chǎn)激素符合魚類生理規(guī)律,有利于卵母細(xì)胞的成熟,性腺發(fā)育不好的親魚采用兩次注射可避免引起親魚的生理過激反應(yīng),而引起卵子成熟和排卵過程不一致,從而影響產(chǎn)卵和受精效果。二次注射親魚發(fā)情時間較為穩(wěn)定,催產(chǎn)率、受精率和孵化率較高,效果要好于一次注射法,但二次注射法易使親魚受傷。兩次注射的針距主要根據(jù)水溫而定,水溫較低,針距時間間隔可以稍微長些;水溫高,針距可以短些,一般為6~12h。性腺發(fā)育較差的親魚,可以適當(dāng)延長針距,并以流水刺激,利于親魚的發(fā)情、產(chǎn)卵。

催產(chǎn)時,一般控制親魚在早晨或上午產(chǎn)卵,以利于后續(xù)工作。二次注射時,第一針一般在上午進(jìn)行,傍晚注射第二針,控制親魚在次日清晨產(chǎn)卵,采用一次注射時,大都在下午注射,次日清晨便可產(chǎn)卵。

5、效應(yīng)時間 

親魚自末次注射催產(chǎn)劑到發(fā)情產(chǎn)卵所需的時間稱之為效應(yīng)時間。效應(yīng)時間包括發(fā)情效應(yīng)時間和產(chǎn)卵效應(yīng)時間,前者指親魚自末次注射催產(chǎn)劑到發(fā)情所需的時間;后者指親魚末次注射催產(chǎn)劑到產(chǎn)卵所需的時間。準(zhǔn)確推算效應(yīng)時間有利于預(yù)測親魚發(fā)情產(chǎn)卵時間,對掌握人工授精的時間具有重要意義。

效應(yīng)時間的長短與親魚種類、催產(chǎn)劑種類、水溫、注射次數(shù)以及水質(zhì)條件有關(guān)。不同種類催產(chǎn)劑的靶器官存在差異,效應(yīng)時間也不同,注射PG或HCG的效應(yīng)時間均要短于LRH-A;兩次注射效應(yīng)時間要短于一次注射效應(yīng)時間;親魚性腺發(fā)育好,效應(yīng)時間較短,發(fā)育差,效應(yīng)時間較長;水溫高,效應(yīng)時間短,水溫低,效應(yīng)時間長。

魚類是變溫動物,新陳代謝隨溫度升降而出現(xiàn)很大差異,水溫是決定效應(yīng)時間的主要因素。催產(chǎn)時,突然降溫將延長效應(yīng)時間,甚至可能導(dǎo)致親魚正常產(chǎn)卵活動停止。因此,催產(chǎn)時應(yīng)掌握當(dāng)?shù)氐乃疁刈兓闆r。

四、產(chǎn)卵設(shè)施的準(zhǔn)備

魚類的人工繁殖季節(jié)性很強(qiáng),時間短而集中,因此在催產(chǎn)前,務(wù)必做好產(chǎn)卵設(shè)施的準(zhǔn)備工作,才能不失時機(jī)地完成對親魚進(jìn)行人工催產(chǎn)。

1、產(chǎn)卵池 

使用前要進(jìn)行徹底消毒處理。

2、洞穴式人工魚巢 

斑點叉尾鮰、淡水白鯧、尖塘鱧等魚類喜歡在洞穴中進(jìn)行配對交配、產(chǎn)卵受精,需要在產(chǎn)卵池中準(zhǔn)備木桶、瓦罐,或者用石頭、磚塊等搭建洞穴式的人工魚巢,供親魚繁殖。

3、植物式人工魚巢 

供產(chǎn)粘性卵魚類作為魚巢,受精卵附著孵化。首先將棕櫚樹皮、水草、楊柳樹根須或人造纖維消毒后扎成束均勻懸吊于產(chǎn)卵池中,棕櫚樹皮和楊柳樹根須需經(jīng)水煮曬干去除單寧酸等有毒物質(zhì)后使用,親魚便在人工魚巢上產(chǎn)卵,應(yīng)及時將粘附卵的魚巢取出孵化,再放入新魚巢。

4、其他 

擔(dān)架(魚夾)、臉盆、毛巾、羽毛、注射器、天平、生理鹽水等。

第五節(jié) 產(chǎn)卵與受精

經(jīng)注射催產(chǎn)劑的親魚,在產(chǎn)卵前有明顯的雌、雄追逐興奮的現(xiàn)象,稱為發(fā)情。當(dāng)發(fā)情達(dá)到高潮時,親魚就開始產(chǎn)卵、排精。因此,準(zhǔn)確判斷發(fā)情排卵時刻相當(dāng)重要,特別是采用人工授精方法時,如果對發(fā)情判斷不準(zhǔn),采卵不及時,將直接影響受精率和孵化率。過早采卵,親魚卵子未達(dá)生理成熟;過遲采卵,親魚已把卵產(chǎn)出體外,或排卵滯留時間過長,卵子過熟,影響受精率和孵化率。所以,在將要達(dá)到產(chǎn)卵效應(yīng)時,應(yīng)密切觀察親魚發(fā)情情況,確定適宜的采卵時間。

親魚發(fā)情時,首先是水面出現(xiàn)波紋或浪花,并不時露出水面,多尾雄親魚緊緊追著雌親魚,有時并用頭部頂撞雌魚的腹部,這是雌、雄魚在水下興奮追逐的表現(xiàn),如果波浪繼續(xù)間歇出現(xiàn),且次數(shù)越來越密,波浪越來越大,表明發(fā)情將達(dá)到高潮,此時應(yīng)做好采卵、授精的準(zhǔn)備工作。

一、自然產(chǎn)卵、受精

親魚經(jīng)過人工催產(chǎn)后,移入產(chǎn)卵池,保持流水刺激。發(fā)情親魚高度興奮后,常常見到雌魚被幾尾雄魚緊緊追逐,摩擦雌魚腹部,甚至將雌魚抬出水面,有時雌、雄魚急速擺動身體,或腹部靠近,尾部彎曲,扭在一起,顫抖著胸、腹鰭產(chǎn)卵、排精。這種親魚自行產(chǎn)卵、排精,完成受精作用的過程叫自然產(chǎn)卵受精。一般親魚發(fā)情后,要經(jīng)過一段時間的產(chǎn)卵活動,才能完成產(chǎn)卵全過程。整個過程持續(xù)時間隨魚的種類、環(huán)境條件等而不同。

采用親魚自然產(chǎn)卵、受精方式,應(yīng)注意產(chǎn)卵池管理。必須有人值班,觀察親魚動態(tài),并保持環(huán)境安靜。還要在產(chǎn)卵池收卵槽上掛好收卵網(wǎng)箱,利用水流帶動,將受精卵收集于收卵網(wǎng)箱中。親魚發(fā)情30min后,及時檢查收卵網(wǎng)箱,觀察是否有卵出現(xiàn)。當(dāng)魚卵大量出現(xiàn)后,用小盒或手抄網(wǎng)將卵及時撈出,防止受精卵在網(wǎng)箱中積聚太多而窒息死亡,并將受精卵移到孵化池中孵化。

二、人工授精

(一)授精方法

在進(jìn)行雜交、育種等科研工作時,或在雄魚少或性腺發(fā)育差時,或在魚體受傷較重及產(chǎn)卵時間已過而未產(chǎn)卵的情況下,可采用人工授精法,即人為地使精、卵混合在一起,完成受精過程。人工受精的關(guān)鍵在于準(zhǔn)確掌握效應(yīng)時間。過早地拉網(wǎng)擠卵,不僅擠不出,還會因驚擾而造成泄產(chǎn);若過晚則錯過了生理成熟期,魚卵受精率低,甚至根本不能受精。

1、精液制備 

成熟的雄親魚大多數(shù)種類可人工直接擠出精液。然而,鲇形目一些魚類,如長吻鮠、瓦氏黃顙魚、黃顙魚、斑鱯等由于雄魚的精巢呈樹枝狀,精液很難擠出,人工授精時需“殺雄取精”,先剪斷雄魚鰓動脈放血,避免血液污染精巢,剖開雄魚腹部后迅速將整個精巢摘出,放在研缽中研磨,得到精巢液。精子在水中存活的時間極短,一般在30s左右,所以需盡快進(jìn)行人工授精,否則,精子活力下降導(dǎo)致受精率降低。

2、人工授精方法

(1)干法人工授精 

干法受精將發(fā)情至高潮或到了預(yù)期發(fā)情產(chǎn)卵時間的親魚捕起,一人抱住魚,頭向上尾向下并用手按住生殖孔(以免卵流到水中),另一人用手握尾柄并用毛巾將魚體腹部擦干,隨后用手柔和地擠壓腹部(先后部,后前部),先把魚卵擠于盆中(每盆可放20萬粒左右,千萬不要帶進(jìn)水),然后將精液擠于魚卵上,用羽毛或手均勻攪動1min左右,再加少量清水拌和,靜置2~3min,慢慢加入半盆清水,繼續(xù)攪動,使精子和卵子充分結(jié)合,然后倒去渾濁水,再用清水洗卵3~4次,當(dāng)看到卵膜吸水膨脹后便可移入孵化器中孵化。

(2)濕法人工授精 

在臉盆內(nèi)裝少量清水,每人各握一尾雌魚或雄魚,分別同時將卵子和精液擠入盆內(nèi),并用羽毛輕輕攪和,使精卵充分混勻,之后,操作步驟同干法人工授精。

(3)半干法人工授精 

簡單來說就是將雄魚精液先用0.7%生理鹽水稀釋后再與擠出的卵子混合的授精方法。

人工授精過程中應(yīng)避免親魚的精子和卵子受陽光直射。操作人員要配合協(xié)調(diào),動作要輕、快、準(zhǔn)。否則,易造成親魚受傷,人工授精失敗,并引起產(chǎn)后親魚死亡。

(二)產(chǎn)卵情況

(1)全產(chǎn) 

采用人工授精,或者自然受精產(chǎn)卵后,雌魚腹部空癟、腹壁松弛,輕壓腹部可能有少量卵粒流出,表明親魚培育良好、成熟度高、催產(chǎn)劑質(zhì)量好、催產(chǎn)劑量準(zhǔn)確、催產(chǎn)季節(jié)和環(huán)境條件適宜、受精適時。

(2)半產(chǎn) 

雌魚腹部有所縮小,但沒有空癟,雌魚腹部仍較膨脹,可能已排卵,但卵子未能全部產(chǎn)出,原因在于雌魚性腺發(fā)育較差,體質(zhì)較弱或受傷等。若此時卵子過熟,應(yīng)將雌魚體內(nèi)的卵子全部擠除,以免腹腔膨脹,造成親魚死亡。另一種情況是雌魚未完全排卵,僅有部分卵子產(chǎn)出,其余還未成熟。這是由于雌魚性腺成熟度差或催產(chǎn)劑量不足,應(yīng)將親魚放回產(chǎn)卵池,一段時間后雌魚可能再出現(xiàn)產(chǎn)卵。人工授精時,不能強(qiáng)行擠卵,否則出現(xiàn)親魚受損傷及受精失敗。

(3)難產(chǎn) 

催產(chǎn)后,雌魚腹部明顯增大、腹部變硬,可能是由于催產(chǎn)劑量過大,卵子遭到破壞;也可能雌魚對激素敏感,激素進(jìn)入魚體內(nèi)過早產(chǎn)生效應(yīng),而卵巢濾泡發(fā)育未完成,二者失調(diào)造成卵子吸水膨脹。有時見到雌魚生殖孔紅腫,生殖孔被卵塊堵住,輕壓腹部有混濁并微帶黃色液體或血水流出,取卵檢查,發(fā)現(xiàn)卵子失去彈性和光澤,表明卵巢已經(jīng)退化。這是由于水溫過高,排卵和產(chǎn)卵不協(xié)調(diào),生殖孔充血發(fā)炎。這種情況的親魚極易產(chǎn)后死亡,應(yīng)盡量將親魚腹水和卵子擠出,然后放入水質(zhì)較好的池塘中精心護(hù)理。

(4)未產(chǎn) 

催產(chǎn)后親魚在預(yù)定時間內(nèi)不發(fā)情或發(fā)情不明顯,腹部無明顯變化,擠壓腹部沒卵流出,稱為未產(chǎn)。雌魚未產(chǎn)可能是性腺發(fā)育差、激素失效或注射劑量過低、催產(chǎn)水溫過低或過高等原因引起,未產(chǎn)親魚一般不宜強(qiáng)行進(jìn)行第二次催產(chǎn),以免對親魚造成傷害,應(yīng)加強(qiáng)親魚的選育工作。如果是由于催產(chǎn)劑失效引起親魚未產(chǎn),則可以再補(bǔ)針催產(chǎn)。

自然受精與人工授精相比,優(yōu)點更多。因此,當(dāng)親魚性腺成熟、體質(zhì)壯,雌雄比例適宜時,應(yīng)盡量進(jìn)行自然產(chǎn)卵、受精,或以自然受精為主,人工授精為輔。

三、影響受精的主要因素

生產(chǎn)上一般用受精率衡量催產(chǎn)技術(shù)水平的高低,當(dāng)魚苗發(fā)育到原腸期時,取魚卵100粒,在白瓷盆中肉眼觀察,統(tǒng)計受精卵數(shù)和混濁、發(fā)白的死亡卵數(shù),受精卵占統(tǒng)計總卵數(shù)的百分比即是受精率。影響受精率的因素有以下幾種。

1、精、卵子質(zhì)量 

精、卵質(zhì)量高,受精率自然較高,親魚性腺發(fā)育不良或已過熟、退化,或者因催產(chǎn)技術(shù)不當(dāng),均會降低魚類卵子和精子質(zhì)量。精、卵質(zhì)量不高,往往會影響受精率,而且受精后胚胎的畸形率和死亡率也較高,進(jìn)而影響孵化率。

2、雌雄魚配比 

硬骨魚類雖為單精入卵受精,但在受精時,卻有成千上萬的精子附著在卵的表面,這對保證單一精子入卵完成受精起著重要作用。一般每粒魚卵占有2~20萬精子時,受精率隨占有的精子數(shù)量的增加而快速提高,當(dāng)達(dá)到30~40萬精子時,受精率趨于穩(wěn)定。故需一定數(shù)量的精子才能保證所有卵子都能受精。因而,當(dāng)雌雄魚比例失調(diào)或雄魚產(chǎn)精量不足時,會制約受精率。

3、授精過程 

人工授精的每個細(xì)節(jié)都有可能影響到受精率,例如擠精和擠卵同步性、光照、水溫、血污、水分、精子和卵子混勻程度等。為了提高受精率,親魚授精過程應(yīng)盡量避免光照,授精時間最好在早上,擠精和擠卵應(yīng)做到同步。如采用干法人工授精,要將雌雄魚用毛巾擦干,避免水對精卵造成影響。

第六節(jié) 孵化

人工孵化是指受精卵經(jīng)胚胎發(fā)育到仔魚出膜的全過程。根據(jù)受精卵胚胎發(fā)育的生物學(xué)特點,人為創(chuàng)造適宜的孵化條件,使胚胎正常發(fā)育,孵出仔魚。在孵化過程中,胚胎發(fā)育受多種因子的影響。為了提高孵化率,必須充分了解和掌握胚胎發(fā)育的特點以及對外環(huán)境的要求。

一、受精卵的孵化

1、卵子質(zhì)量鑒定 

正常得到的卵子,卵球大小一致,卵膜吸水速度快,堅韌度大,細(xì)胞分裂正常。而產(chǎn)出的不熟或過熟卵子,在進(jìn)行孵化之前,應(yīng)將這些卵子淘汰掉。

1、漂流性卵的孵化(以四大家魚為例)

家魚屬敞水性產(chǎn)卵類型,其卵子的孵化需要充足的溶氧和一定的流水。漂浮性卵一般在孵化環(huán)道中流水孵化,孵化密度為100萬粒卵/m3。受精卵剛放入時,水流不宜太大,一般水流速度為0.15~0.30m/s,以卵剛好呈漂浮狀為宜。在胚胎發(fā)育過程中,可適當(dāng)增大水流以保持氧氣的足夠供應(yīng)。仔魚破膜時,氧氣消耗量大,且剛出膜的仔魚,器官發(fā)育不全、鰾未形成,無胸鰭,不會游泳,非常嬌嫩,易下沉窒息,此時應(yīng)加大水流,使其能在水中漂游。當(dāng)仔魚能平游時,體內(nèi)卵黃囊逐漸消失,并能頂流,此時宜適當(dāng)減緩水流,以免消耗仔魚體內(nèi)營養(yǎng)。孵化過程中產(chǎn)生的污物和后期脫落的卵膜一起聚集在過濾紗窗上,導(dǎo)致水流不暢,要及時清除,防止水的溢出。在孵化時要注意遮蔭,仔魚出膜后不要立即移出,而是待到鰾充氣(出現(xiàn)“腰點”)、卵黃囊基本消失、能開口攝食后再出苗。

(二)粘性卵的孵化(以鯉為例)

1、池塘孵化 

目前生產(chǎn)上多直接使用魚苗培育池進(jìn)行孵化,以減少魚苗轉(zhuǎn)塘的麻煩和損失。將粘有魚卵的魚巢放入池中水下10cm即可孵化,每666.7m2水面可放30~50萬粒卵(以下塘魚苗20萬為準(zhǔn))。魚苗剛孵出時,不可立即將魚巢取出,此時魚苗大部分時間附著在魚巢上,靠卵黃囊提供營養(yǎng),到魚苗能主動游泳覓食時,才能撈出魚巢。

2、淋水孵化 

將粘附魚卵的魚巢懸吊在室內(nèi)或平鋪在架子上,用淋水的方法使魚巢保持濕潤。孵化期間,室溫保持在20~25。此法能人為控制孵化時室內(nèi)溫度、濕度,觀察胚胎發(fā)育情況,具有孵化速度一致,減少水霉病感染,孵化不受天氣變化影響等優(yōu)點。當(dāng)胚胎發(fā)育到發(fā)眼期時應(yīng)立即將魚巢移到孵化池內(nèi)孵化,注意室內(nèi)與水池溫度相差不超過5。

3、脫粘流水孵化 

鯉的粘性卵在人工授精后2~3min,通過去粘性處理,便可用四大家魚的孵化設(shè)備進(jìn)行流水孵化。此法可以避免受敵害生物侵襲,而且水質(zhì)清新,溶氧豐富,適于大規(guī)模生產(chǎn),又不用制作魚巢,節(jié)約材料和省時。但脫粘過程中,卵膜易受脫粘劑懸浮顆粒的損傷,在保證不缺氧的前提下,應(yīng)盡量減慢流水孵化器的水流,防止魚卵受傷害。鲇形目中有些魚類的受精卵不適宜脫粘孵化,如瓦氏黃顙魚脫粘流水孵化時,受精卵的孵化率極低。

常用于孵化的魚卵脫粘方法有以下幾種。

(1)泥漿脫粘法 

先用黃泥土與水混合成稀泥漿水,一般5 kg水加0.5~1kg黃泥,經(jīng)40目網(wǎng)布過濾。脫粘方法是先將泥漿水不停翻動,同時將受精卵緩慢倒入泥漿水中,待全部受精卵撒入泥漿水中后,繼續(xù)翻動泥漿水2~3min。最后將脫粘受精卵移入網(wǎng)箱中洗去多余的泥漿,即可放入孵化器中流水孵化。

(2)滑石粉脫粘法 

將100g滑石粉即硅酸鎂加20~25g食鹽溶于10L水中,攪拌成懸濁液,即可用來脫除有粘性的鯉魚卵1~1.5kg。操作時一邊向懸濁液中慢慢倒入魚卵,一邊用羽毛輕輕攪動,經(jīng)30min后,受精卵呈分散顆粒狀,達(dá)到脫粘效果。經(jīng)漂洗后放入孵化器中進(jìn)行流水孵化。

(3)尿素脫粘法 

受精后3~5min,將受精卵先加入1.5倍的1號脫粘液(3g/L的尿素和4g/L的氯化鈉混合水溶液),用羽毛攪拌1.5~2h,倒去1號脫粘液再加入相當(dāng)于受精卵10倍的2號脫粘液(8.5g/L的尿素水溶液),每隔15min攪拌一次,經(jīng)2~3h即可用清水清洗魚卵,便完全脫粘,然后放入孵化器中孵化。該法脫粘效果較好,卵膜透明,易觀察胚胎發(fā)育情況,但脫粘時間過長,生產(chǎn)效率較低。

(4)清水機(jī)械脫粘法 

將500g的受精卵放入100~150mL水中,用人工或機(jī)械方法帶動羽毛,輕輕攪動1min,再加入0.5L水,并迅速攪拌2~3min,然后加入1.0~1.5L水,繼續(xù)攪動25~30min,即可將粘性脫去。此法可以避免脫粘劑顆粒對卵膜的損傷,從而減少水霉病發(fā)生。

(二)浮性卵的孵化(以石斑魚為例)

石斑魚產(chǎn)浮性卵,可以在孵化環(huán)道、水泥池、土池中人工孵化,生產(chǎn)上大多采用孵化桶在室內(nèi)孵化,孵化密度不宜超過80萬粒/m3水體,在桶中央放置一氣石,氣流速度以能使魚卵或仔魚較均勻懸浮在水中為度。受精卵發(fā)育到原腸期后,發(fā)育正常的胚胎無色透明,死卵呈白色,有死卵時應(yīng)停止充氣10~15min,正常卵上浮,未受精的卵和發(fā)育不正常的死卵及少量雜物沉于孵化桶底部,開啟孵化桶底部排水閥,緩慢排水,將死卵及雜物排除,之后立即恢復(fù)充氣,并加水至正常水位。孵化用水必須清新,需經(jīng)過砂濾,并用紫外光殺菌。孵化過程中的污物漂浮在水面上,可以用軟吸管清除。海水魚卵在孵化時需要注意調(diào)節(jié)鹽度,在不同鹽度條件下,卵的沉浮狀態(tài)不同。如水溫25~26條件下,鹽度低于25.6時,鞍帶石斑魚的卵沉底;鹽度高于27.1時,卵則上浮。

(三)沉性卵的孵化(以虹鱒為例)

虹鱒的受精卵吸水膨脹后,放入孵化器進(jìn)行孵化。通常在孵化室內(nèi)進(jìn)行,避免陽光直射。目前廣泛采用孵化桶或平列槽(一種用玻璃鋼制成的仔魚飼育槽,上口長3m,寬0.42m;底長2.98m,寬0.42m,后部有一直徑為5cm可上下活動調(diào)節(jié)槽內(nèi)水位的排水管,槽內(nèi)套6個小槽,共可容納仔魚5~6萬尾),根據(jù)孵化桶的大小,孵化密度介于2萬粒到10萬粒魚卵之間。孵化用水自下部流經(jīng)全部魚卵后從上部溢出,每桶注水量4~7L/min。孵化過程中,當(dāng)明顯出現(xiàn)眼點時應(yīng)轉(zhuǎn)入平列槽,并人工揀除死卵。也可單獨在孵化桶或平列槽中孵化。水溫在8~10時,30~35d魚苗孵出。整個孵化期間均使魚卵處于安靜狀態(tài),并嚴(yán)格避免光照。

二、孵化管理措施

精心管理是提高孵化率的關(guān)鍵之一。魚卵孵化期間,必須保證孵化環(huán)境包括水溫、溶氧、鹽度、酸堿度、水流速度、敵害生物和病害控制等因素便于魚類胚胎發(fā)育。

孵化前,必須將孵化器材(如孵化桶、魚巢等)洗刷干凈并消毒,并防止孵化器漏水跑苗。魚卵孵化過程中,應(yīng)密切注意氧氣供給。孵化期間要根據(jù)胚胎發(fā)育時期分別給予不同的水流量或充氣量,孵化初期水流量過大,充氧量過大會破壞卵膜,造成卵膜早溶(水質(zhì)正常條件下,四大家魚卵用10mg/L高錳酸鉀浸泡可使卵膜增厚加硬,在一定程度上預(yù)防卵膜早溶),從而影響孵化率。孵化中期,隨著胚胎發(fā)育耗氧量增加,應(yīng)增加水量或充氣量,保證胚胎正常發(fā)育。溶氧量降低、密度增大和水溫升高,能使孵化酶分泌量增多,從而加快脫膜和溶膜速度,所以為了加速胚胎出膜速度以及出膜整齊度,可在即將出膜時停水、停氣約5~10min或添加100~150g/L的1398蛋白酶,可使卵膜在8~25min內(nèi)溶解完畢,不會影響孵化率。出膜后,為防止魚苗沉底造成缺氧窒息,可適當(dāng)加大充氣量或水流量。仔魚平游期后,應(yīng)適當(dāng)降低充氣量或水流量,避免魚苗頂水流時消耗體能。

同時,定期檢查水溫、水質(zhì)和胚胎發(fā)育情況,及時清理卵膜和代謝產(chǎn)生的污物,保持水質(zhì)清新,預(yù)防病害及敵害生物的影響。孵化過程中,如發(fā)現(xiàn)野雜魚類在產(chǎn)卵池中產(chǎn)卵孵化,要及時將仔魚移出,尤其是羅非魚,避免被親魚吞食。

三、影響孵化的環(huán)境因子

受精卵孵化過程中,水溫、溶解氧、鹽度、光照、混濁度、敵害生物等因子均影響胚胎發(fā)育,如果環(huán)境因子不適宜,就會大大降低孵化率。

1、水溫 

水溫是胚胎發(fā)育的重要因素之一,受精卵孵化所需溫度范圍隨親魚種類而變化,如冷水性魚類虹鱒胚胎發(fā)育適溫范圍為7~13,最適水溫為9;溫水性魚類,如四大家魚受精卵孵化適溫范圍為22~28,最適宜水溫為26±1;熱帶魚類,如斜帶石斑魚胚胎發(fā)育的適宜水溫為25~28

在適溫范圍內(nèi),隨著溫度升高胚胎發(fā)育速度加快,當(dāng)水溫過低時,胚胎發(fā)育速度減慢,顯著延遲仔魚孵化,且會導(dǎo)致胚胎成活率急劇下降;當(dāng)超出適宜溫度范圍時,胚胎發(fā)育停滯或不能正常發(fā)育,導(dǎo)致孵化率下降,畸形率上升。當(dāng)將處于低溫中的胚胎放入到較高的適宜水溫中孵化時,可加速胚胎發(fā)育并顯著提高孵化率,如將鮭和青鳉胚胎先預(yù)冷后隨之提高水溫,可使孵化率提高及孵化進(jìn)程同步化,這有利于控制胚胎的孵化時間與進(jìn)程(Schoots,1983)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),大西洋鱈胚胎孵化溫度過低時不利于幼體的開口攝食,致使抗應(yīng)激能力差,并且不利于仔稚魚的培育。

2、溶氧 

魚類胚胎個體發(fā)育耗氧率存在較大差異,同種不同個體之間、不同種之間胚胎發(fā)育所需要氧氣均不同,發(fā)育時期不同差異也較大。隨著胚胎的發(fā)育,耗氧量逐漸增加,鰱在胚胎期的尾芽出現(xiàn)后,耗氧量驟然增加,為早期的2倍多。某些熱帶珊瑚礁魚類隨著水溫升高,其胚胎發(fā)育耗氧量也上升(Collins,1993)。

3、水流 

流水式的孵化工具,如孵化桶、缸、槽和孵化環(huán)道等,均是為了滿足胚胎發(fā)育需氧等條件而設(shè)計的。受精卵在流動的水體中孵化時,可以得到充足的氧氣,且流水可以溶解并及時帶走胚胎代謝產(chǎn)物,減少水質(zhì)污染;流水還能刺激孵化酶的分泌,使仔魚提前出膜,鱖受精卵在流水孵化環(huán)道中孵化要比在靜水中孵化快得多。通過調(diào)節(jié)水的流量,使受精卵在水中適度地懸浮,可以有效抑制真菌的感染,同時也可將死卵和活卵分開。在胚胎發(fā)育早期,胚胎對外界刺激比較敏感,此時流量不應(yīng)過大,微懸浮即可。達(dá)到眼點期后,流量可增大,使受精卵懸浮運動增強(qiáng)。在魚苗孵化出膜時,對流量變化更為敏感,應(yīng)適當(dāng)調(diào)小水流量。在確定水流量時,還應(yīng)考慮魚的種類差異,有些魚類可能對懸浮較為敏感。

4、光線 

魚類胚胎發(fā)育對光的反應(yīng)具有遺傳因素。因此,光線對不同生態(tài)類群的魚類胚胎發(fā)育有著不同的影響。鱘卵在有光線條件比在黑暗條件下胚胎發(fā)育速度平均要快18~26h。而且,在有光線情況下發(fā)育孵出的仔魚個體較長和較重。黃鱔受精卵的發(fā)育需要有光的條件,500~1500lx范圍時孵化率較高,在這范圍內(nèi)隨著照度的升高出膜時間逐漸縮短,但不能超過1500lx,否則孵化率下降。直射的光線對于產(chǎn)卵于石礫中的鮭鱒魚類的胚胎發(fā)育不利,引起胚胎畸形率增加。一般來說,浮性卵發(fā)育所需的光照強(qiáng)度比沉性卵、尤其是比埋在砂下的卵要強(qiáng)一些。

5、鹽度 

許多海水魚類受精卵在自然海水的鹽度低或高的較大范圍內(nèi)保持其形態(tài)不發(fā)生改變,當(dāng)鹽度過高或過低時,卵膜難以調(diào)節(jié)細(xì)胞與周圍介質(zhì)之間的物質(zhì)平衡,會造成卵細(xì)胞損傷;不同鹽度會造成受精卵沉浮性變化,鹽度低時會導(dǎo)致完全沉性,較高時會導(dǎo)致完全浮性,完全沉性和完全浮性均不利于孵化。鹽度對胚胎的影響因魚種類而異,且與魚的生態(tài)習(xí)性密切相關(guān)。軍曹魚在鹽度29~38范圍內(nèi),胚胎的孵化率無顯著差異,當(dāng)鹽度超出或低于此范圍時,孵化率降幅達(dá)到18~49%,且仔魚畸形率明顯提高。

6、敵害生物 

在孵化中,小蝦、小魚、蝌蚪、橈足類等對魚卵和魚苗構(gòu)成嚴(yán)重危害,敵害生物的危害程度與卵的密度、敵害生物的數(shù)量以及接觸時間密切相關(guān)。小魚、蝌蚪等對魚卵、魚苗能直接吞食;橈足類、枝角類等用它們的附肢刺破卵膜或咬傷魚苗,進(jìn)而吮吸魚卵、魚苗的營養(yǎng),造成胚胎或孵化魚苗死亡。


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